Ứng dụng kỹ thuật tạo màu để kiểm tra nội độc tố vi khuẩn

Kỹ thuật tạo màu là một trong ba kỹ thuật bao gồm kỹ thuật đông gel và kỹ thuật đo độ đục để phát hiện hoặc định lượng nội độc tố từ vi khuẩn gram âm bằng cách sử dụng dịch ly giải tế bào amip chiết xuất từ ​​máu xanh của cua móng ngựa (Limulus polyphemus hoặc Tachypleus tridentatus).Nó có thể được phân loại là xét nghiệm tạo sắc tố điểm cuối hoặc xét nghiệm tạo sắc tố động học dựa trên nguyên tắc xét nghiệm cụ thể được sử dụng.

Nguyên lý phản ứng là: dịch ly giải tế bào amebocyte chứa một loạt enzyme serine protease (proenzym) có thể được kích hoạt bởi nội độc tố của vi khuẩn.Nội độc tố kích hoạt các proenzim để tạo ra các enzim hoạt hóa (được gọi là coagulase), chất này xúc tác cho sự phân tách chất nền không màu, giải phóng sản phẩm pNA có màu vàng.pNA được giải phóng có thể được đo bằng trắc quang ở bước sóng 405nm.Và độ hấp thụ có mối tương quan dương với nồng độ nội độc tố, sau đó nồng độ nội độc tố có thể được định lượng tương ứng.


Thời gian đăng: 29-09-2019